熒光濾光片
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熒光濾光片廣泛應(yīng)用于生化分析鄰域,熒光濾光片一般包含三片組合,即激發(fā)濾光片、二色鏡和發(fā)射濾光片。
激發(fā)濾光片(Exciting Filter, Exciter Filter,Excitation Filter ):在熒光顯微鏡中,只有激發(fā)熒光的波長(zhǎng)可通過的濾光片。也有直接使用激光作為激發(fā)光。
二色鏡(Dichroic Mirror,Dichroic Beamsplitter,Dichromatic Beamsplitter):又稱二向色濾光片或分色鏡。與顯微鏡的光路呈45°角放置。這片濾光片反射一種顏色光(激發(fā)光)并且透射另一種顏色光(發(fā)射光),激發(fā)光的反射率大于90%,發(fā)射光的透射率大于90%。光譜中不能透過的部分被反射而不是被吸收。濾光片在透射光和反射光下的顏色互為補(bǔ)色,因而又稱二向色濾光片。
發(fā)射濾光片(Emitting Filter,Emission Filter ,Barrier Filter,Emitter):選擇并傳輸樣本發(fā)出的熒光,其他范圍光線截止。發(fā)射光的波長(zhǎng)比激發(fā)光的波長(zhǎng)要長(zhǎng)??梢赃x擇帶通濾光片或者長(zhǎng)波通濾光片作為發(fā)射濾光片。
常用的有與635nm激發(fā)波長(zhǎng)680nm發(fā)射波長(zhǎng)配套的635nm高反射率675nm~730nm高透過率的二色鏡和中心波長(zhǎng)680nm截止深度OD5的窄帶濾光片,由于激發(fā)光采用的是氦氖激光器(波長(zhǎng)為632.8nm),免去了激發(fā)濾光片。